如何制备多克隆抗体?
将抗原注入到实验动物体内,一系列生成抗体的细胞会不同程度的与抗原结合,受抗原刺激后会产生不同类型的抗体,获得的免疫血清很有多种抗体的混合物,即多克隆抗体。
操作步骤:
1. 免疫原 指能刺激机体免疫系统产生特异性抗体或致敏**细胞的抗原,包括有天然抗原、人工合成抗原;或一些蛋白质、多糖、脂类、核酸抗原。
2. 动物免疫
A 免疫动物:免疫动物种属与抗原的来源差异越远越好,以雄性为佳。抗体需要量少时,选用家兔、豚鼠和鸡等小动物;需要量大时,选用山羊、马、驴等大动物。
B 免疫方法: 应考虑免疫剂量、免疫途径、免疫次数、免疫间隔等因素。**免疫时剂量不宜过大,以免产生免疫麻痹。免疫的途径通常有皮内、皮下、肌肉、静脉、腹腔、**结等。免疫间隔时间**与**次一般以10~20天为佳,二次后一般为7~10天。
3. 动物采血
采集免疫血清前,要预先测定抗体效价,在末次免疫后一周及时采血。方法主要有劲动脉采血、心脏采血、静脉采血法等。