细胞计数实验
一、实验目的
掌握细胞计数的方法和操作要领。
二、实验用品
血球计数板、载玻片、盖玻片、吸管、试管架、eppendorf管、吸头、吸头盒、普通显微镜、细胞悬液。
三、实验方法
1. 取一副血球计数板，将计数板载玻片、盖玻片洗干净，擦干。将盖玻片盖在计数板上。
2. 取移液管一支，伸入培养瓶中，轻轻用移液管将细胞悬液混匀（反复吸放移液管橡胶头），然后吸取少量悬液滴一滴于盖玻片与计数板载玻片的边缘上，利用溶液的虹吸现象，使其自动流入计数室内。悬液注入量不应过多或过少，计数室内不应有气泡。滴液不当和产生大量气泡，则须重新洗净计数板，擦干后再次滴入细胞悬液，否则影响细胞计数。
3. 悬液滴入计数室后，静置2～3分钟，待细胞在计数室中下沉后，再在低倍镜下观察计数。依照白细胞计数法，数计数板四角的大方格内的细胞总数，计数时应循一定的路径，以免遗漏或重复计数，对压在格子线上的细胞，根据“数上不数下，数左不数右”的原则进行计数。然后按下式计算出每毫升细胞悬液中的细胞数。
细胞数/ml=(四大格中的细胞总数/4)x104
每人至少重复计数2～3次，取其平均数。如细胞原液经过稀释，则稀释液的细胞数乘以稀释倍数，即为细胞原液的细胞数。