单克隆抗体中建立ELISA方法的注意事项
如何利用ELISA筛选以及ELISA方法操作的注意事项，下面我先起个头吧，谈谈我的个人经验：）
ELISA，全称酶联**吸附实验，主要利用的是抗原抗体特异性结合的特点，可分为直接法、间接法、双抗体夹心法、竞争法等。下面以间接法为例进行介绍：
1、方阵ELISA。用途：①融合前后确定鼠血清中抗体效价；②拿到单抗腹水后，需要建立ELISA方法时首先要确定包被原及抗体的*佳工作浓度。
经典的方阵ELISA：将抗原和抗体各自稀释成不同梯度浓度，结果OD值P/N>2的均判为阳性，选取OD值在1.0左右的那个Ag-Ab浓度为*佳工作浓度，其主要原因与酶标仪灵敏度有关。
但是，对于抗原抗体而言，由于它们被稀释成不同浓度，那么在理论上，每个抗原稀释度情况下，总有一个抗体的稀释度其OD值在1.0左右，那么到底选取哪一个OD值1.0左右的好呢？这就需要同时用**做个抑制来看，哪个浓度下抑制情况好，就取哪个抗原抗体浓度做工作浓度。