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M13a (pirellula) medium

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产品名称: M13a (pirellula) medium
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产品展商: TIANDZ
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简单介绍

M13a (pirellula) medium生物缓冲物质的质量要求严格,如pKa值约在6~8之间;在水系中要有较好的溶解性,在有机溶剂中要有极小的溶解性;M13a (pirellula) medium对生物膜要较无渗透性;受浓度、温度,以及介质中离子的影响要极小;能与阳离子形成可溶性络合物;干燥或溶液状态有极好的稳定性等。


M13a (pirellula) medium  的详细介绍

DNA提取 :一、M13a (pirellula) medium实验原理

DNA是遗传信息的载体,是*重要的生物信息分子,因此DNA的提取也是分子生物学实验技术中*重要、*基本的操作之一。我公司提供从各种不同来源的样品(如**、**、血液、培养细胞、动物组织及植物组织等)中提取高纯度基因组DNA的服务。

二、实验步骤    

1、细胞裂解   

CTAB法    CTABhexadecyltrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵)是一种阳离子去污剂,可融解细胞膜,并与核酸形成符合物。该复合物在高盐溶液中(>0.7M NaCl)是可溶的,M13a (pirellula) medium通过有机溶剂抽提,去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。此法多用于植物组织、**等材料。   

SDS法    SDS是一种阴离子去污剂,高温(55-65℃)下可裂解细胞,使蛋白变性、染色体解析。常用于血液、**、酵母、动物组织、细胞等样品基因组DNA的提取。    

● 其他方法    物理方法如机械剪切、超声波破碎、匀浆等,化学方法如异硫氰酸胍、碱裂解、蛋白酶K消化等。

2DNA分离纯化    

● 用酚/氯仿抽提裂解液,收集水相,乙醇沉淀DNA,*后用TE溶解DNA沉淀。    

3DNA的定量及检测   

M13a (pirellula) medium琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段的分子质量。    

● 紫外分光光度计检测DNA浓度    DNAOD260处有显著吸收峰,OD260值为1相当于大约50ug/ml双链DNA。提取的基因组DNA样品浓度=OD260×50ug/ml×稀释倍数。   

● 紫外分光光度计检测DNA纯度   

一般用OD260/OD280值检测DNA样品的纯度。OD260/OD280值约为1.7-1.9,说明DNA纯度较好;若小于1.7有可能有蛋白污染;若大于2.0,说明有RNA污染或DNA已经降解。

三、M13a (pirellula) medium样品处理

因细胞结构及所含成分不同,样品预处理的方法也有差异。不同样品的预处理方法大致如下:  

● 植物组织——液氮研磨    

● 动物组织——匀浆、液氮研磨    

● 培养细胞——蛋白酶K消化    

● 细    菌——溶菌酶消化    

● 酵    母——Lyticase消化、玻璃珠破碎   

M13a (pirellula) medium注意:客户*好提供新鲜的样品或取样后立即在低温(-20℃或-70℃)冷冻保存的样品,避免反复冻溶。

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