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血清 or 血浆?ELISA指标检测要怎么选?

血清 or 血浆?ELISA指标检测要怎么选?

全血、血浆、血清的区别

1. 血清多用于血液生化、**等方面的测定;

2. 血浆多用于凝血等方面的测定;

3. 全血则多用在血细胞、血沉等方面的测定。



颜色 成分
血液 红色 血细胞+血浆
血浆 淡黄色半透明 不含血细胞

含纤维蛋白原

血清 黄色透明 不含血细胞

不含纤维蛋白原

小知识:血浆可以通过去除纤维蛋白原等凝血因子形成血清。


血 清

血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗凝剂,则凝血反应被激活,血液迅速凝固,形成胶冻。凝血块收缩,其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清,也可于凝血后经离心取得。


在凝血过程中,纤维蛋白原转变成纤维蛋白块,所以血清中无纤维蛋白原,这一点是与血浆*大的区别。而在凝血反应中,血小板释放出许多物质,各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化,如凝血酶原变成凝血酶,并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。


为避免抗凝剂的干扰,血液中许多化学成分的分析,都以血清为样品。  


血清的基本成分

[血清蛋白] 总蛋白、白蛋白、球蛋白、TTT、ZTT。

[有机盐] 肌氨酸酐、尿素氮、尿酸、肌氨酸酐·净化值。

[糖质] 血糖、Glycohemoglopin。

[脂质] 胆固醇、三甘油脂、β-脂蛋白、HDL胆固醇。

[血清酵素] GOT、GPT、γ-GTP、LDH(乳酸脱水酵素)、淀粉酶、碱性碳酸酶、酸性碳酸酶、胆素脂酶、醛缩酶。

[色素] 胆红素、ICG、BSP。 

[电解质] 钠(Na)、钾(K)、钙(Ca)、氯(Cl)。

[**] 甲状腺***、甲状腺刺激***。



血 浆

血浆是离开血管的全血经抗凝处理后,通过离心沉淀,所获得的不含细胞成分的液体,其中含有纤维蛋白原(纤维蛋白原能转换成纤维蛋白,具有凝血作用),若向血浆中加入钙离子,血浆会发生再凝固,因此血浆中不含游离的钙离子。


血浆的基本成分

[血浆蛋白] 血浆蛋白可分为白蛋白、球蛋白、和纤维蛋白原等几种成分。

[非蛋白氮] 血中蛋白质以外的含氮物质,总称非蛋白氮。主要是尿素,此外还有尿酸、肌酐、氨基酸、多肽、氨和胆红素等。

[无机盐] 血浆中的无机物,绝大部分以离子状态存在。阳离子中以Na+浓度*高,还有K+、Ca2+和Mg2+等,阴离子中以Cl-*多,HCO3-次之,还有HPO42-和SO42-等。





血清、血浆如何分离?

血清制备方法

使用无热原无内**的试管或离心管采集血液样本,将试管或离心管在室内温度下放置自然凝固(视室温环境10分钟到2小时不等)或4℃过夜,分离出血清,(建议倾斜试管或离心管以扩大液面的横截面,使血清能更大程度的分离出来,),2-6℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,立即进行测定,建议在-20℃或-80℃下将收集的血清分装保存,避免反复冻融,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。


血浆制备方法

应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠、枸橼酸纳或柠檬酸钠作为抗凝剂,使用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液样本,采集后30分钟内,混合10-20分钟后,2-6℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清液(血浆),建议在-20℃或-80℃下将收集的血清分装保存,避免反复冻融。样本应避免溶血或高血脂。保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。


血清、血浆分离的注意事项

血清、血浆分离过程中特别需要注意两点:防止溶血和细胞混入


1.血液环境的稳定性与保存时间的长短呈反比,细胞膜的稳定性也在下降,在这种情况下,应尽快开展血清、血浆的分离,并严格按照操作说明进行,避免出现溶血现象,血清、血浆分离后务必避免反复冻融。


2.离心速度不能过快,过快的离心速度会造成红细胞压积,容易产生溶血。


3.血液样品如不能马上进行血清或血浆的分离,则尽量冷藏保存和运输,但是,优良不能冷冻,否则血细胞会形成冰晶造成细胞破裂而溶血。


小知识:
1.抗凝剂选择:不同的抗凝剂有其不同的分子构型,会对血液中各细胞的细胞膜产生不同的作用,有的会增加细胞膜的稳定性,有的会降低细胞膜的稳定性,所以选择一款合适的抗凝剂至关重要(检测前请仔细阅读ELISA试剂盒说明书,查看该试剂盒针对抗凝剂是否有特殊要求)。


2.样品处理不当的危害:血液存放过程中温度过高或反复冻融对细胞膜有很大的损害。温度过高及反复冻融会使细胞膜上的结构蛋白构象发生改变,进而造成细胞膜的弹性降低以致破解产生溶血现象,所以用于分离血清、血浆的血液应避免反复冻融。


血清质量是怎样影响检测的?

1. 溶血:红细胞的破裂会引起血浆成分的改变,对一些生化项目如谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、钾的测定结果造成较大的影响。若进行抗体类检测本身血清的颜色会干扰到*终的酶标仪读数。


2. 脂血:在运用比色法和比浊法检测的项目中,脂血中的乳糜微粒具有散射光的特性不能通过双波长进行消除从而影响检测结果。


3. 黄疸:黄疸的血清中含有胆红素,若样本放置时间过长或通过氧化剂后胆红素还可被氧化为胆绿素、胆褐素,这些色素在不同波长范围具有一定的光吸收,从而影响检验结果。


常见的血液生化指标与**

常见的血液生化指标:血糖(GLU)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、肌酐(Crc)、尿素氮(BUN)、胆固醇(CHO)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)、镁、钙等。


常见的**:睾酮(T)、孕酮(P)、雌二醇(E2)、三碘甲腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)等。

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