柱式病毒RNAOUT使用说明书
Column Vrial RNAOUT
产品及特点
本产品是在天泽基因一管式病毒RNAOUT的基础上开发的、专门用于从血清(血浆)等液体样品中提取微量病毒RNA的产品，它具有下列特点：
1. 操作简单，整个过程只需要20分钟左右，不需要额外在洗柱液中补加乙醇。
2. 灵敏度高，通过RT-PCR检测到的*终灵敏度可以达到50拷贝/mL。
3. **无毒，不需要使用苯酚和氯仿等有机溶液。
4. 如果加上病毒离心富集步骤，*多可以处理1.5 mL液体病毒样品。
5. 与RT-PCR和荧光RT-PCR兼容。
6. 价廉物美，性价比远低于国外同类产品。
7. 适用于各种材料，包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无细胞材料。
规格及成分
成份
编号
大纸盒包装
柱式病毒RNAout溶液A
71001A
30 mL
离心吸附柱（小提）
60911
50套
通用洗柱液
60408
50 mL
RNA洗脱液
71207
10 mL
使用手册
1份
运输及保存
常温运输，4℃保存，有效期一年。
自备试剂
无
使用方法
1. 在1.5 mL离心管中加入0.1-0.2 mL液体病毒样品。如果病毒需要富集，可以将1.5 mL液体在4℃下24，000 g冷冻离心60分钟，移弃1.3 mL后继续操作。
2. 加入0.6 mL溶液A，振荡30秒混匀后室温放置10分钟。注意：溶液 A 在 4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在 65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 将溶液全部转移到离心吸附柱中，室温放置2分钟。
4. 12，000-15，000 g室温离心1分钟，弃收集管中穿透液。
5. 加入0.8 mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12，000-15，000 g室温离心1分钟，弃收集管中穿透液。
6. 12，000-15，000 g室温离心半分钟。
7. 在离心吸附柱的滤膜的中部加入30-100 uL通用洗脱液，然后将离心吸附柱套入一新的1.5 mL离心管中，室温放置2分钟。
8. 12，000-15，000 g室温离心1分钟，离心管中收集的样品即为RNA。
9. RNA样品可以直接用于RT-PCR或逆转录反应，也可放-80℃长期保存。
相关资料
常见人类**相关RNA病毒
病毒
简称
**名称
类型
长度(Kb)
Measles virus
MV
measles
ssRNA
4.5~85
Hepatitis A Virus
HAV
hepatitis type A
7.5
Poliomyelitis virus
PV
polio
7.8
Rubella virus
RV
German measles
7.9
Hepatitis C Virus
HCV
hepatitis type C
9.3~9.4
Human immunodeficiency virus
HIV
AIDS
9.7
Dengue Virus
DV
dengue
11
Yellow fever virus
YFV
yellow fever .
Rabies virus
rabies
11.9
Influenza A virus
IAV
influenza
13.5
Mumps virus
MuV
mumps
15.4
Ebola virus
EBV
virus hemorrhagic fever
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疑难解答
Q：提取液体样品/病毒核酸(RNA或DNA)为何很难？
A：原因一是量少。病毒颗粒中的RNA或DNA是作为遗传物质保存，每个病毒*多只携带几个拷贝(而一个细胞中有上万种RNA分子，每种RNA有很多拷贝)，同时其长度也十分有限(一般不到细胞基因组的万分之一)，样品中病毒数往往又不是很多，使得样品中病毒核酸的**量往往比一个细胞中核酸的**量还少，所以操作中十分容易丢失。另外，由于得到的核酸**量很少，不能使用电泳和测OD检测，只能通过PCR或RT-PCR检测，而PCR或RT-PCR的条件又需要优化，所以要确定提取是否成功十分不容易。
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