菌体内****剂使用说明书
英文名称：Bacterial Endotoxin Erasol
产品及特点
内**(即lipopolysaccharides，LPS)是E.coli细胞壁的主要成分，传统的去除内**的方法是将内**和DNA一起纯化出来，然后再用各种方法去除其中的内**，操作繁琐，DNA回收率低。本产品可以直接把E.coli表面的内**去除，从根本上避免了内**对后续操作（如质粒DNA提取，重组蛋白质提取）的污染。本产品具有下列特点：
1. 头个在菌体收集阶段去除内**的产品，从源头上避免了内**跟DNA和胞浆蛋白的接触，从根本上防止了可能产生的污染。
2. 操作简单快速，用酶溶液温和清洗菌体3-4次即可去掉**表面的内**，只需要10分钟左右时间，不需要复杂仪器设备。
3. 高效，能去除99%以上的内**。
4. 跟各种质粒DNA提取、基因组DNA提取和蛋白质提取等操作兼容，DNA丢失率只有10%左右（其他方法DNA丢失率可以高达50%）。
5. 不影响DNA和绝大部分蛋白质的活性，处理过的质粒DNA可用于转染实验。
6. 既可小规模使用(在1.5 mL离心管内)，也可放量用于大规模无内**质粒DNA提取和无内**蛋白质纯化。
规格及成分
成 份
编 号
200 mL包装
本产品
90901
200 mL
使用手册
90901sc
1份
运输及保存
常温运输和保存，有效期一年。
自备试剂
无
使用方法
一：用于菌液小于3 mL的样品
1. 收集1.5-3 mL E.coli饱和菌液，12,000 rpm离心1分钟，弃上清，得到**沉淀。
2. 加入1 mL本产品温和混匀后10,000-12,000 rpm离心1分钟，弃上清（含内**）。
3. 再重复上述操作3-4次，得到的菌体可以直接进入后续的无内**质粒DNA提取或无内**蛋白质提取程序。
二：用于菌液多于3 mL的样品
整个操作同上，只是在15或50 mL 塑料离心管中进行，离心速度不能超过离心管的承受力，本产品的用量按比例增加。
常见问题
Q:为何用常规的方法很难去除生物样品中的内**?
A:因为内**带电性跟DNA和部分蛋白质相同，所以基于带电性的分离方法(如硅胶膜吸附，离子交换吸附)不能将它们分开;同时内**又是双性分子（类似于细胞膜的磷脂分子），能够形成大小不等的聚合物，跟质粒DNA和蛋白质大小接近，所以基于分子量大小的分离方法(如凝胶排阻过滤和氯化铯超速离心)也不能将其有效分离。
关联产品
固相内****剂（CAT#:60608）
背景资料
内**的分子结构
外**vs.内**
区别要点
外**（Exotoxin）
内**（Endotoxin）
存在部位
由活的**释放至**体外,为**的代谢产物
为**细胞外壁结构成份，细胞破裂后释出
**种类
以革兰氏阳性菌多见
革兰氏阴性菌多见
化学特性
蛋白质（分子量27～900 KDa），易被分解破坏，热不稳定（60℃以上能迅速破坏）
磷脂一多糖一蛋白质复合物（毒性主要为类脂A），不易被分解破坏，耐热（60℃耐受数小时）
毒性作用
强，微量对实验动物有致死作用（以ug计量）。各种外**有选择作用，引起特殊病变，不引起宿主发热反应。抑制蛋白质合成，有细胞毒性、神经毒性、紊乱水盐代谢等
稍弱，对实验动物致死作用的量比外**为大。各种**内素的毒性作用大致相同。引起发热、弥漫性血管内凝血、粒细胞减少血症、施瓦兹曼现象等
抗原性
强，可刺激机体产生高效价的抗**。经甲醛处理可脱毒成为类毒霉，仍有较强的抗原性，可用于人工自动**
弱，刺激机体对多糖成份产生抗体，不形成抗**，不能经甲醛处理成为类**而使毒性消失
其他
几乎无发热性，对肿瘤细胞无影响
很强的发热性，破坏肿瘤细胞
例子
白喉**，肉毒**，破伤风*******，溶血性链球菌**等
大肠杆菌，霍乱绿脓菌，沙门氏菌，赤痢菌等。