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多克隆抗体佐剂应用
多克隆抗体通常是由多个抗原决定簇组成的,由一种抗原决定簇刺激机体,由一个B**细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆抗体(Monclone antibody)。由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体,机体内所产生的抗体就是多克隆抗体;除了抗原决定簇的多样性以外,同样一种抗原决定簇,也可刺激机体产生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五类抗体。抗原刺激机体,产生免疫学反应,由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白,这就是免疫球蛋白,这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。
1.佐剂的类型 目前实践中常应用的佐剂有氢氧化铝胶、明矾、弗氏佐剂、脂质体和石蜡
油等。也有采用结合杆菌等分枝杆菌、白喉杆菌以及细小棒状杆菌等。
⑴ 弗氏不完全佐剂(incomplete Freund's adjuvant,IFA)
羊毛脂 1 份
石蜡油 5 份
混合,高压**后保存。用时加热融化,冷却至 50℃左右,加抗原进行乳化处理。
⑵ 弗氏完全佐剂(complete Freund's adjuvant,CFA)
弗氏不完全佐剂 10ml
卡介苗 10mg~200mg 卡介苗可 100℃10min 灭活处理。
初次免疫时,*好用弗氏完全佐剂,以刺激机体产生较强的免疫反应。再次免疫时,一般不用完全佐剂,而采用弗氏不完全佐剂。但在研究分枝杆菌及相关抗原时,一般不用弗氏完全佐剂,以免卡介苗的干扰。
⑶ 脂质体:是人工制备的类脂质的小球体,由一个或多个酷似细胞膜的类脂双分子层组成,这种结构使其能够携带各种亲水的、疏水的和两性物质,他们被包裹在脂质体内部的水相中,或插入类脂双分子层或吸附、联接在脂质体的表面,起到明显的免疫增强作用。
⑷ 油佐剂 :采用植物油和矿物油均可,包括豆油、花生油、油菜油等。目前应用*广的矿物油。 10 号 白油(石蜡油) 100ml
硬脂酸铝 2g
司本 80 6ml
混合加热融化,分装。用时按下列配方进行乳化。
油相 3 份
水相(加 4%吐温-80) 1 份
先把油相搅拌起来,然后缓慢加入水相乳化。司本是油分散剂,吐温是水分散剂,均有利于
乳化。
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